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Título :	Las formas activa (ADHa) e inactiva (ADHi) de la PQQ-alcohol deshidrogenasa de Gluconacetobacter diazotrophicus difieren en sus respectivas estructuras oligoméricas y el estado redox de sus grupos protésicos correspondientes The active (ADHa) and inactive (ADHi) forms of the PQQ-alcohol dehydrogenase from Gluconacetobacter diazotrophicus differ in their respective oligomeric structures and redox state of their corresponding prosthetic groups
Creador:	Gómez Manzo, Saúl
Nivel de acceso:	Open access
Palabras clave :	Ácidos - química Alcohol Deshidrogenasa - química Membrana Celular - química Medios de Cultivo - química Citocromos c - química Transporte de Electrón Activación Enzimática Pruebas de Enzimas Etanol - química Gluconacetobacter - enzimología Concentración de Iones de Hidrógeno Peso Molecular Oxidación-Reducción Cofactor PQQ - química Conformación Proteica Titulometría - métodos Ubiquinona - química Acids - chemistry Alcohol Dehydrogenase - chemistry Cell Membrane - chemistry Culture Media - chemistry Cytochromes c - chemistry Electron Transport Enzyme Activation Enzyme Assays Ethanol - chemistry Gluconacetobacter - enzymology Hydrogen-Ion Concentration Molecular Weight Oxidation-Reduction PQQ Cofactor - chemistry Protein Conformation Titrimetry - methods Ubiquinone - chemistry inactivo del alcohol deshidrogenasa citocromo tipo c Gluconacetobacter diazotrophicus quinona de pyrroloquinoline Inactive alcohol dehydrogenase Cytochrome c type Gluconacetobacter diazotrophicus Quinoline pyrroloquinoline
Descripción :	La alcohol deshidrogenasa ligada a la membrana de Gluconacetobacter diazotrophicus contiene un resto de pirroloquinolina quinona (PQQ), un grupo [2Fe-2S] y cuatro citocromos de tipo c. Aquí, describimos una enzima nueva e inactiva. ADHi, al igual que ADHa, es un heterodímero de subunidades de 72 y 44 kDa y contiene los grupos protésicos esperados. Sin embargo, ADHa mostró una triple masa molecular en comparación con ADHi. Es de destacar que el PQQ, el [2Fe-2S] y la mayoría de los citocromos en el ADHi purificado está en forma oxidada, contrastando con ADHa donde se detecta la semiquinona PQQ y queda el aglomerado [2Fe-2S] así como los citocromos c Completamente reducido después de la purificación. Cinética de reducción de las enzimas ferricianuro-oxidados demostró que mientras ADHa fue traído de vuelta por el etanol a su estado de reducción total, en ADHi, sólo una cuarta parte del heme total c se redujo. El ADHi reducido en ditionito se oxidó en gran parte por la ubiquinona-2, lo que indica que la transferencia intramolecular de electrones no se altera en el ADHi. El pH ácido del medio podría ser perjudicial para la ADH unida a la membrana provocando cambios conformacionales que conducen a cambios en la orientación relativa de los grupos de hemo y desplazamiento del potencial redox correspondiente a valores más altos. Esto dificultaría la transferencia de electrones resultando en la baja actividad observada en ADHi The membrane-bound alcohol dehydrogenase of Gluconacetobacter diazotrophicus contains one pyrroloquinoline quinone moiety (PQQ), one [2Fe-2S] cluster, and four c-type cytochromes. Here, we describe a novel and inactive enzyme. ADHi, similarly to ADHa, is a heterodimer of 72- and 44-kDa subunits and contains the expected prosthetic groups. However, ADHa showed a threefold molecular mass as compared to ADHi. Noteworthy, the PQQ, the [2Fe-2S] and most of the cytochromes in purified ADHi is in the oxidized form, contrasting with ADHa where the PQQ-semiquinone is detected and the [2Fe-2S] cluster as well as the cytochromes c remained fully reduced after purification. Reduction kinetics of the ferricyanide-oxidized enzymes showed that while ADHa was brought back by ethanol to its full reduction state, in ADHi, only one-quarter of the total heme c was reduced. The dithionite-reduced ADHi was largely oxidized by ubiquinone-2, thus indicating that intramolecular electron transfer is not impaired in ADHi. The acidic pH of the medium might be deleterious for the membrane-bound ADH by causing conformational changes leading to changes in the relative orientation of heme groups and shift of corresponding redox potential to higher values. This would hamper electron transfer resulting in the low activity observed in ADHi. © 2011 Federation of European Microbiological Societies. Published by Blackwell Publishing Ltd. All rights reserved.
Colaborador(es) u otros Autores:	González-Valdez AA Oria-Hernández J Reyes-Vivas H Arreguín-Espinosa R Kroneck PM Sosa-Torres ME Escamilla JE.
Fecha de publicación :	2012
Tipo de publicación:	Artículo
Formato:	pdf
Identificador del Recurso :	10.1111/j.1574-6968.2011.02487.x
Fuente:	FEMS Microbiology Letters 328(2):106 - 113
URI :	http://repositorio.pediatria.gob.mx:8180/handle/20.500.12103/2868
Idioma:	eng
Aparece en las colecciones:	Artículos

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