ADAM15 participates in fertilization through a physical interaction with acrogranin

Pastén K

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Título :	ADAM15 participates in fertilization through a physical interaction with acrogranin
Creador:	Pastén K
Nivel de acceso:	Open access
Palabras clave :	Proteínas ADAM - fisiología Fertilización - fisiología Cobayas - fisiología Péptidos y Proteínas de Señalización Intercelular - fisiología Interacciones Espermatozoide-Óvulo - fisiología ADAM Proteins - physiology Fertilization - physiology Guinea Pigs - physiology Intercellular Signaling Peptides and Proteins - physiology Sperm-Ovum Interactions - physiology Fertilización en mamiferos proteinas de fusión interacción espermatozoide - ovulo Fertilization in mammals Fusion proteins Spermatozoon interaction - ovule
Descripción :	La fertilización de los mamíferos se completa con la interacción directa entre el esperma y el óvulo. Este proceso está mediado principalmente por la adhesión y las proteínas de fusión de membrana que se encuentran en la superficie del gameto. ADAM1, 2 y 3 son miembros de la familia de proteínas ADAM y han participado en la unión espermatozoide-huevo. En este estudio, demostrar el procesamiento proteolítico de ADAM15 durante la maduración epididimal de espermatozoides de cobayo para producir una forma madura de un tamaño de 45 kDa. Encontramos que el tamaño del ADAM15 maduro, 45 kDa, en espermatozoides epididimales cauda indica que el dominio pro-dominio y metaloproteasa están ausentes. Además, utilizando inmunofluorescencia indirecta, ADAM15 se encontró a través del acrosoma, en la región ecuatorial ya lo largo del flagelo de espermatozoides de cobaya. Después de la reacción acrosómica, ADAM15 se pierde de la región acrosomal y se retiene en la región ecuatorial y flagelo. En este estudio, también informamos de la primera evidencia de un complejo entre ADAM15 y acrogranina. Por inmunoprecipitación, se detectó una banda proteica de 65 kDa que co-inmunoprecipitados juntos ADAM15. El análisis de la secuencia N-terminal de esta proteína de 65 kDa ha revelado su identidad como acrogranina. Además, utilizando etiquetado de superficie celular, ADAM15 se encontró estar presente en la superficie celular. Los ensayos de fertilización heteróloga mostraron que el anticuerpo contra la acrogranina inhibía la adhesión esperma-óvulo. Curiosamente, ADAM15 y acrogranina también se encontraron asociados en dos líneas de células de cáncer de mama. En conclusión, nuestros resultados demostraron que ADAM15 y acrogranina están presentes y asociados con la superficie de los espermatozoides de cobayas; Además de ambas proteínas pueden desempeñar un papel durante la esperma-huevo vinculante Mammalian fertilization is completed by direct interaction between sperm and egg. This process is primarily mediated by both adhesion and membrane-fusion proteins found on the gamete surface. ADAM1, 2, and 3 are members of the ADAMs protein family, and have been involved in sperm-egg binding. In this study, we demonstrate the proteolytic processing of ADAM15 during epididymal maturation of guinea pig spermatozoa to produce a mature form a size of 45 kDa. We find that the size of the mature ADAM15, 45 kDa, in cauda epididymal spermatozoa indicates that the pro-domain and metalloprotease domain are absent. In addition, using indirect immunofluorescence, ADAM15 was found throughout the acrosome, at the equatorial region and along the flagellum of guinea pig spermatozoa. After acrosome reaction, ADAM15 is lost from the acrosomal region and retained in the equatorial region and flagellum. In this study, we also report the first evidence of a complex between ADAM15 and acrogranin. By immunoprecipitation, we detected a protein band of 65 kDa which co-immunoprecipated together ADAM15. Analysis of the N-terminal sequence of this 65 kDa protein has revealed its identity as acrogranin. In addition, using cell-surface labeling, ADAM15 was found to be present on the cell surface. Assays of heterologous fertilization showed that the antibody against acrogranin inhibited the sperm-egg adhesion. Interestingly, ADAM15 and acrogranin were also found associated in two breast cancer cell lines. In conclusion, our results demonstrated that ADAM15 and acrogranin are present on and associated with the surface of guinea pig spermatozoa; besides both proteins may play a role during sperm-egg binding
Colaborador(es) u otros Autores:	Bastian Y Roa-Espitia AL Maldonado-García D Mendoza-Hernández G Ortiz-García CI Mújica A Hernández-González EO
Fecha de publicación :	2014
Tipo de publicación:	Artículo
Formato:	pdf
Identificador del Recurso :	10.1530/REP-14-0179
Fuente:	Reproduction 148(6):623-634
URI :	http://repositorio.pediatria.gob.mx:8180/handle/20.500.12103/2653
Idioma:	eng
Aparece en las colecciones:	Artículos

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