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Título :	Fanconi anemia cells with unrepaired DNA damage activate components of the checkpoint recovery process
Creador:	Rodríguez A
Nivel de acceso:	Open access
Palabras clave :	Western Blotting Neoplasias de la Mama - patología Ciclo Celular - efectos de drogas Puntos de Control del Ciclo Celular - efectos de drogas División Celular - efectos de drogas Línea Celular Daño del ADN Reparación del ADN - efectos de drogas Densitometría Anemia de Fanconi -patología Femenino Regulación de la Expresión Génica - efectos de drogas Redes Reguladoras de Genes - efectos de drogas Humanos Mitomicina -farmacología Mutación - genética Blotting, Western Breast Neoplasms - pathology Cell Cycle - drug effects Cell Cycle Checkpoints - drug effects Cell Division - drug effects Cell Line DNA Damage DNA Repair - drug effects Densitometry Fanconi Anemia - pathology Female Gene Expression Regulation - drug effects Gene Regulatory Networks - drug effects Humans Mitomycin - pharmacology Mutation - genetics Daño del ADN, recuperación de Checkpoint modelo de red booleana DNA damage, Checkpoint recovery Boolean network model
Descripción :	La vía de FA / BRCA repara los entrecruzamientos de ADN entre los canales. Mutaciones en Esta vía causa anemia de Fanconi (FA), un síndrome de inestabilidad cromosómica con hueso Insuficiencia de la médula y predisposición al cáncer. Sobre el daño del ADN, las células normales y FA Inhiben la progresión del ciclo celular, hasta que el punto de control G2 / M es desactivado por el punto de control Recuperación, que se activa cuando el daño del ADN ha sido reparado. Curiosamente, las células de FA altamente dañadas parecen anular el punto de control G2 / M. En esto Estudio exploramos con un modelo de red booleana y experimentos clave La activación de la recuperación del punto de control ocurre en las células FA con daño extenso del ADN no reparado. Métodos: Se realizaron simulaciones síncronas / asincrónicas de la FA / BRCA Pathway Modelo de red booleana. Se usaron líneas de células FA-A y linfoblastoides normales Para estudiar el punto de control y la activación de la recuperación del punto de control después de la inducción del daño del ADN. El enfoque experimental incluyó análisis de ciclo celular de citometría de flujo, división celular Seguimiento, análisis de la aberración cromosómica y el análisis de la expresión génica a través de qRT-PCR Y mancha occidental. Resultados: Las simulaciones computacionales sugirieron que en FA mutantes recuperación de punto de control Actividad inhibe los componentes del punto de control a pesar del daño no Comportamiento que no observamos en simulaciones de tipo salvaje. Este resultado implica que FA Las células eventualmente volverían a entrar en el ciclo celular después de un daño inducido por el ADN G2 / M Detención del punto de control, pero antes de que el daño se haya solucionado. Se observó que las células FA-A Activar el punto de control G2 / M y detener en la fase G2, pero eventualmente llegar a la mitosis y Se dividen con daño no reparado del ADN, resolviendo así el punto de detención inicial. Basado En nuestro modelo de resultado buscamos la actividad ectópica de los componentes de recuperación de punto de control. Encontramos que los componentes de recuperación de punto de control, tales como PLK1, se expresan a un Las células normales no dañadas, a pesar de que las células FA-A poseen ADN dañado. Conclusiones: Nuestros resultados muestran que las células FA, a pesar del daño extenso al ADN, no Pérdida de la capacidad de expresar los componentes transcripcionales y de proteínas del punto de control Recuperación que eventualmente podría permitir su división con daños irreparables del ADN. Esta Podría permitir la supervivencia celular, pero aumenta la inestabilidad genómica inherente a FA Individuos y promueve el cáncer Background: The FA/BRCA pathway repairs DNA interstrand crosslinks. Mutations in this pathway cause Fanconi anemia (FA), a chromosome instability syndrome with bone marrow failure and cancer predisposition. Upon DNA damage, normal and FA cells inhibit the cell cycle progression, until the G2/M checkpoint is turned off by the checkpoint recovery, which becomes activated when the DNA damage has been repaired. Interestingly, highly damaged FA cells seem to override the G2/M checkpoint. In this study we explored with a Boolean network model and key experiments whether checkpoint recovery activation occurs in FA cells with extensive unrepaired DNA damage. Methods: We performed synchronous/asynchronous simulations of the FA/BRCA pathway Boolean network model. FA-A and normal lymphoblastoid cell lines were used to study checkpoint and checkpoint recovery activation after DNA damage induction. The experimental approach included flow cytometry cell cycle analysis, cell division tracking, chromosome aberration analysis and gene expression analysis through qRT-PCR and western blot. Results: Computational simulations suggested that in FA mutants checkpoint recovery activity inhibits the checkpoint components despite unrepaired DNA damage, a behavior that we did not observed in wild-type simulations. This result implies that FA cells would eventually reenter the cell cycle after a DNA damage induced G2/M checkpoint arrest, but before the damage has been fixed. We observed that FA-A cells activate the G2/M checkpoint and arrest in G2 phase, but eventually reach mitosis and divide with unrepaired DNA damage, thus resolving the initial checkpoint arrest. Based on our model result we look for ectopic activity of checkpoint recovery components. We found that checkpoint recovery components, such as PLK1, are expressed to a similar extent as normal undamaged cells do, even though FA-A cells harbor highly damaged DNA. Conclusions: Our results show that FA cells, despite extensive DNA damage, do not loss the capacity to express the transcriptional and protein components of checkpoint recovery that might eventually allow their division with unrepaired DNA damage. This might allow cell survival but increases the genomic instability inherent to FA individuals and promotes cancer. © 2015 Rodríguez et al.
Colaborador(es) u otros Autores:	Torres L3 Juárez U4 Sosa D5 Azpeitia E6 7 8 García-de Teresa B9 Cortés E10 Ortíz R11 Salazar AM12 Ostrosky-Wegman P13 Mendoza L14 15 Frías S
Fecha de publicación :	2015
Tipo de publicación:	Artículo
Formato:	pdf
Identificador del Recurso :	10.1186/s12976-015-0011-4
Fuente:	Theoretical Biology and Medical Modelling 12(1):1--22
URI :	http://repositorio.pediatria.gob.mx:8180/handle/20.500.12103/2432
Idioma:	eng
Aparece en las colecciones:	Artículos

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